2020年台州医疗卫生考试:检验学《不同标本中蛋白质的检测方法》
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蛋白质的检测不像葡萄糖的检测一样,检测方法基本相同,对于蛋白质的检测,不同的标本有不一样的检测方法,为方便记忆,现对蛋白质的检测做一下总结:
一、尿液中蛋白质的检测
定性方法:
1.试带法(pH指示剂蛋白误差法):对清蛋白敏感,适于健康普查或临床筛检。
2.加热乙酸法:传统的经典方法,能同时检出清蛋白及球蛋白。
3.磺基水杨酸法(磺柳酸法):尿蛋白的确诊实验。
定量方法:双缩脲比色法。
二、脑脊液中蛋白质的检测
定性方法:
1.Pandy试验:脑脊液中球蛋白质与苯酚结合,形成不溶性蛋白盐,灵敏度高(假阳性率较高)。
2.硫酸铵试验(Ross-Jone试验和Nonne-Apelt试验):Ross-Jone试验(罗琼试验):检测球蛋白,特异性高)。
定量方法:
1.比浊法:临床多采用磺基水杨酸-硫酸钠比浊法。
2.比色法:邻苯三酚红钼法,比色法优于比浊法。
三、浆膜腔积液中蛋白质的检测
定性方法:Rivalta试验(李凡他试验):黏蛋白是一种酸性糖蛋白,浆膜间皮细胞在炎症反应刺激下分泌黏蛋白增加,其等电点为pH3〜5,在稀乙酸溶液中产生白色雾状沉淀。可粗略区分渗出液和漏出液。
定量方法:双缩脲比色法。
四、血清中蛋白质的检测
总蛋白:
1.常规方法:双缩脲比色法:蛋白质分子中的肽键在碱性条件下与二价铜离子作用生成蓝紫色的化合物,
2.参考方法:凯氏定氮法。
3.灵敏度最高的方法:酚试剂法。
清蛋白:溴甲酚绿法:溴甲酚绿是一种阴离子染料,在pH 4.2的缓冲液中,与清蛋白结合成复合物,溶液由未结合前的黄色变成蓝绿色,在628 nm波长的吸光度与清蛋白浓度成正比。
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