2022年台州医疗卫生考试:检验学《单克隆抗体的制备及临床应用》
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2022年台州医疗卫生考试:检验学《单克隆抗体的制备及临床应用》
单细胞克隆分泌的抗体即为单克隆抗体。单细胞克隆的本质是杂交瘤细胞,具有两个主要的功能,一个是分泌特异性抗体,另一个是在体外生长繁殖。
制备的第一步是用不同形式的抗原经不同的免疫途径注射到不同的动物体内。在末次免疫后3~4天,分离脾细胞融合。第二步选择与待融合的B细胞同源并且处于对数生长期,细胞形态和活性佳的瘤细胞株作为融合细胞。第三步是杂交瘤技术的中心环节:细胞融合,基本步骤为将两种细胞按照适宜的比例混合后加入PEG使细胞彼此融合。
筛选阳性株一般选用的骨髓瘤细胞为HAT敏感细胞株,所以只有融合的细胞才能持续存活一周以上。筛选出的阳性细胞株应及早进行抗体制备,因为融合细胞随培养时间延长,发生污染、染色体丢失和细胞死亡的机率增加。选出的阳性细胞株应及早冻存,冻存的温度越低越好。在冻存过程中需要用到冻存保护剂,如二甲亚砜。
单克隆抗体的制备并不是到此为止了,还需要对其中的杂质进行纯化处理。一般采用盐析、凝胶过滤和离子交换层析等方法进行纯化。最有效的McAb纯化方法为亲和层析法。
单克隆抗体在疾病的诊断和治疗预防方面,与常规的抗体相比,特异性强,灵敏度高,优越性非常明显,可利用此特性制成“生物导弹”用来运送药物至病害部位,主要是癌细胞。在生物导弹中,能识别抗原的单克隆抗体充当瞄准镜,将抗癌药物(弹头)传送到癌细胞,从而使抗癌药物发挥药效。
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